L'immunoanalisi a chemiluminescenza (CLIA) è una tecnica immunoenzimatica altamente sensibile.
1. Principio
L'immunoanalisi a chemiluminescenza combina la specificità della risposta immunitaria e l'elevata sensibilità della chemiluminescenza. Il suo principio di base è quello di combinare la risposta immunitaria specifica tra antigene e anticorpo con la reazione di chemiluminescenza. Nello specifico, l'antigene nel campione da testare si combina con un anticorpo specifico per formare un complesso immunitario. Quindi, attraverso una serie di reazioni chimiche, il complesso immunitario produce un segnale chemiluminescente. L'intensità della luminescenza è proporzionale alla concentrazione dell'antigene da testare e il contenuto dell'antigene da testare può essere analizzato quantitativamente rilevando l'intensità della luminescenza.
2. Componenti principali
Anticorpi: inclusi anticorpi di cattura e anticorpi di rilevamento. L'anticorpo di cattura è solitamente fissato su un supporto in fase solida per catturare l'antigene da testare. L'anticorpo di rilevamento è combinato con un marcatore chemiluminescente per rilevare l'antigene nel complesso immunitario.
Supporto in fase solida: come micropiastre, sfere magnetiche, ecc., utilizzati per fissare l'anticorpo di cattura e facilitare la reazione immunitaria, la separazione e il lavaggio.
Marcatore chemiluminescente: solitamente una sostanza in grado di produrre un segnale luminescente in una reazione chimica, come il luminol, l'estere di acridinio, ecc. Il marcatore si combina con l'anticorpo di rilevamento per produrre un segnale chemiluminescente dopo la reazione immunitaria.
Sistema di rilevamento: comprende apparecchiature quali i rilevatori di luminescenza, utilizzati per rilevare l'intensità dei segnali chemiluminescenti e convertirli in valori leggibili.
3. Caratteristiche
Elevata sensibilità: è in grado di rilevare concentrazioni estremamente basse della sostanza in esame, il che è solitamente di diversi ordini di grandezza più sensibile rispetto ai metodi immunoenzimatici tradizionali.
Ampio intervallo lineare: il contenuto della sostanza in esame può essere misurato con precisione in un ampio intervallo di concentrazione senza diluizioni multiple.
Forte specificità: grazie al legame specifico tra antigene e anticorpo, è altamente selettivo per specifiche sostanze in esame.
Rapido: il processo di rilevamento è relativamente rapido e i risultati possono generalmente essere ottenuti in tempi più brevi.
Elevato grado di automazione: è adatto per il rilevamento di campioni su larga scala e può essere utilizzato insieme a strumenti automatizzati per migliorare l'efficienza del rilevamento.
4. Campi di applicazione
Diagnosi clinica: viene utilizzata per rilevare vari biomarcatori, come marcatori tumorali, ormoni, marcatori di malattie infettive, ecc., per fornire una base importante per la diagnosi delle malattie, il monitoraggio del trattamento e la valutazione della prognosi.
Sviluppo di farmaci: viene utilizzato per il monitoraggio della concentrazione dei farmaci, la valutazione dell'efficacia e la ricerca sul metabolismo dei farmaci.
Test di sicurezza alimentare: rilevamento di sostanze nocive, residui di pesticidi, residui di farmaci veterinari, ecc. negli alimenti.
Monitoraggio ambientale: Rilevamento di sostanze inquinanti e tossiche nell'ambiente.